Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞

Hepa 1-6小鼠肝癌細(xì)胞
細(xì)胞株名稱：Hepa 1-6小鼠肝癌細(xì)胞
種     屬 ：小鼠
組 織 來源：肝；肝癌  
生 長特 性：貼壁生長
形 態(tài)特 征：上皮細(xì)胞
描述：此細(xì)胞株源自C57/L小鼠中引發(fā)的BW7756肝癌。此細(xì)胞可以在無血清的培養(yǎng)基中繁殖，培養(yǎng)基成分是：DMEM,75%; Waymouth’s MAB 87/3培養(yǎng)基，25%。添加3x10-8M硒。測試發(fā)現(xiàn)肢骨發(fā)育畸形畸形病毒(鼠痘)陰性。
培養(yǎng)條件:*培養(yǎng)基：DMEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛          血清，10%。
培養(yǎng)條件：37℃  carbon dioxide(CO₂),5%
傳代方法:收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意：傳代后細(xì)胞應(yīng)該用新鮮的培養(yǎng)液，原瓶中的培養(yǎng)液不能再使用。在運(yùn)輸過程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

凍存方法:凍存液：90%*培養(yǎng)液，10%DMSO
儲(chǔ)存：液氮儲(chǔ)存

Hepa 1-6 小鼠肝癌細(xì)胞

DMEM培養(yǎng)基+10%胎牛血清。細(xì)胞貨期8-10個(gè)工作日

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